роман Коронавирус (2019-нКоВ) Нуклеиновая набор для определения кислоты (Флуоресцентный ОТ-ПЦР)

【Предназначен Использование】

В комплект входит TaqMan зонд флуоресцентный в реальном времени ПЦР для качественного обнаружения генов ORF1ab, n нуклеиновой кислота 2019-нКоВ в мазке из зева, мокроте у пациентов с подозрением на симптомы пневмонии и кластеризацией случаев.

Результаты теста предназначены только для клинической справки и не могут рассматриваться как единственный ориентир для клинической диагностики рекомендуется делать явный анализ с учетом клинических симптомов и других лабораторных результатов.

операторы должны иметь опыт профессиональной подготовки в области амплификации генов или тестирования методов молекулярной биологии и иметь соответствующую квалификацию для работы в лаборатории. Лаборатория должна иметь разумные меры биологической безопасности и защитные процедуры.

【 принцип испытания 】

в этом наборе праймеры и зонды предназначены для консервативных и специфических областей ORF1ab, n 2019-nCoV, соответственно. флуоресцентный ПЦР используется для обнаружения вирусной РНК после нуклеиновой кислотная очистка образца РНК.

Это тест-набор использует флуоресцентный анализ в реальном времени ПЦР технологии. Во время ПЦР амплификации, зонд связывается с шаблоном, и 5'-конец репортерная группа зонда расщепляется Taq фермент (5 '→ 3' экзонуклеазная активность), тем самым удаляясь от группа гашения для генерации флуоресцентного сигнала. Кривая амплификации в реальном времени автоматически строится на основе обнаруженного сигнала флуоресценции, и вычисляется значение ct образца ( количество циклов, когда сигнал флуоресценции в каждой реакционной пробирке достигает установленного порога). FAM , ВМЦ и Техас красный флуорофоры утилизированы отметить ORF1ab ген, n зондов гена в реакции растворе. с помощью одного теста качественное определение двух вышеуказанных генов 2019-nCoV может выполняться одновременно.

К Чтобы избежать ложноотрицательного результата, в набор входит внутренний контроль (IC), помеченный Cy5 флуоресцентная группа, которая могла использоваться для контроля процедуры экстракции и реакции раствора.

【 основные компоненты 】

заметка ¹ : Разные партии компонентов не могут обменять.

заметка ² : тестовый набор не содержат нуклеиновые реагент для кислотной экстракции, пожалуйста, подготовьте реагент перед использованием.

1. обработка образцов

добавить 10 мкл внутреннего контроля в 200 мкл положительного контроля и отрицательного контроля, соответственно, чтобы выполнить нуклеиновую кислота экстракция.

2. реагент подготовка:

система подготовка: взять предустановленный Нуклеиновая лиофилизатор для амплификации кислоты, после чего открывают пакет из фольги и немедленно центрифугируют. образец количества каждого теста должен быть кратным 8, содержащим один положительный контроль и один отрицательный control.add 35 мкл без нуклеаз вода на каждая реакция трубка.

3.Пример Загрузка:

добавить 5 мкл образец нуклеиновый кислота для тестирования, положительный контроль, отрицательный контроль, что весь реакционный объем составляет 40 мкл в выделенной реакции solution.for это не требуется тонкая смесь и просто закройте крышку ПЦР реакционная пробирка, центрифугируйте жидкость в стенке пробирки при дно пробирки, таким образом обрабатывая ПЦР усиление.

после проверки было подсчитано, что добавление 5–10 мкл парафиновое масло в ПЦР система не повлияет на ПЦР результат, но избегайте загрязнения и испарения жидкости.